Конечно, у каждого специалиста есть свои мнения и догадки относительно бабезиоза, но в отсутствии полноценной молекулярной диагностики они остаются только догадками и уделом меньшинства специалистов.

Таблица 1

Большинство специалистов признают, по крайней мере, три возбудителя «малого» бабезиоза (пироплазмоза) у собак. Они отличаются по клиническим и генетическим характеристикам, это Babesia gibsoni , Babesia conradae . В другом исследовании бабезии (пироплазмы) были выделены от больных собак на западе США и описаны в оригинальном исследовании как B . gibsoni и Babesia microti —like , последняя позже идентифицирована как Theileria annae (табл. 1).

Кроме того, имеются сообщения о выделении из крови собак, больных бабезиозом, три разновидности Theileria . У небольшого числа собак в Европе были выделены Theileria (Babesia ) equi и Theileria annulata ; и у 82 собак в Южной Африке была выделена неклассифицированная Theileria sp — Южно-Африканская Theileria sp . .

При световой микроскопии интроэритроцитарные стадии Babesia spp . неразличимый от Theileria spp .

На сегодняшний день установлены зоны распространения бабезиоза собак, они перечислены в таблице 1; имеется всесторонняя и современная карта распространения клещевых инфекций собак Европы, Восточной и Юго-Восточная Азии . Как и ожидалось, географическое распространение клещевых инфекций полностью связано с географическим распространением клещей-переносчиков этих заболеваний. Интересно отметить, что распространение Babesia gibsoni не связано с распространением каких-либо клещей, и быстрое глобальное распространение этого возбудителя связано с его уникальной возможностью прямой передачи от больной собаки к здоровой через укусы, минуя какие-либо клещевые векторы .

На сегодняшний день Babesia vogeli является самой распространенной пироплазмой собак, что связано с широчайшим распространением вектора – коричневого собачьего клеща (Rhipicephalus sanguineus ) (табл. 1). Babesia vogeli распространена повсеместно, в тропических и субтропических областях, а также в более прохладных широтах, где кроме Babesia vogeli распространена другая большая бабезия – Babesia canis . Такое распространение часто приводит к микст-инфекциям. Babesia canis передается Dermacentor spp . и имеет все более и более широкое распространение в центральной Европе, тогда как совсем недавно считалось, что ее распространение ограничено Францией .

Babesia rossi преимущественно распространена в Африке (вместе с B . vogeli и B . gibsoni ). Первоначально этот агент был выделен только в Южной Африке, но на сегодняшний день есть сообщения о его выделении и в других регионах Африканского континента, включая Нигерию и Судан , где его распространяют клещи Haemaphysalis spp ., являющиеся энзоотичными для этих мест (табл. 1).
Среди малых бабезий наибольшее географическое распространение получила B . gibsoni . Методом молекулярной идентификации она была обнаружена в южных, восточных и юго-восточных азиатских странах, получив наибольшее распространение там, где практикуются незаконные собачьи бои.

Во всем мире иммуноферментный анализ на протяжении последних 30 лет был самым распространенным тестом на бабезиоз (пироплазмоз) собак . Однако неудовлетворительная специфика из-за перекрестных реакций между Babesia spp . и другими микроорганизмами Apicomplexa , вносили субъективность в окончательные результаты исследования и мешали крупномасштабному применению этих методик. С 2000 года для диагностики бабезиоза начал активно внедряться метод ПЦР.

Возможность ПЦР-диагностики в обнаружении ДНК бабезий (пироплазм) при хроническом течении заболевания можно улучшить, проверяя не один, а несколько образцов крови от подозреваемого животного .

Тяжесть течения бабезиоза у собак и кошек колеблется от субклинической инфекции, при которой развивается невыраженная анемия, до очень тяжелого течения заболевания с развитием синдрома мультиорганного расстройства и быстрой гибели. Факторами, определяющими тяжесть течения, являются вид пироплазмы, вызвавшей заболевание, порода собаки, а также особенности физиологического состояния животного, такие как возраст, иммунный статус, наличие микст- инфекций, а также преморбидное состояние животного. Все виды бабезий (пироплазм) могут вызвать лихорадку, анорексию, спленомегалию, анемию и тромбоцитопению в результате прямого повреждения и разрушения эритроцитов хозяина (гемолиз), снижения осмотической резистентности зараженных эритроцитов.

Клинические особенности бабезиоза были рассмотрены с разных сторон . При длительном наблюдении выявлено, что из всех больших бабезий Babesia vogeli является наименее патогенной, по крайней мере, у взрослых собак, и вызывает самые мягкие формы бабезиоза, часто развиваются хронические формы заболевания. А самой патогенной бабезией является Babesia rossi , выделенная в Африке .

У собак, зараженных Babesia rossi , часто развиваются различные осложнения. При этом такие как гепатопатия и иммунооблусловленный гемолиз утяжеляют течение заболевания, но не вызывают смерть, если должным образом проводится терапия. В то время как ДВС-синдром, энцефалиты, острая почечная недостаточность и отек легких требуют ранней и очень интенсивной терапии. При этом прогноз остается плохим . Напротив, бабезиоз (пироплазмоз), вызываемый Babesia vogeli , часто протекает субклинически, но у щенков в возрасте до 3-4 месяцев заболевание может быть фатальным (рис. 1-5).

Кроме того, бабезиоз (пироплазмоз), вызываемый Babesia vogeli , тяжело протекает у собак с иммунодепрессией, получающих химиотерапию по поводу онкологических заболеваний, после хирургических вмешательств, особенно после спленэктомии.

Тяжесть течения бабезиоза (пироплазмоза), вызванного Babesia canis , Babesia gibsoni , Theileria annae и Babesia conradae , колеблется от умеренного до тяжелого, но может наблюдаться широкий диапазон тяжести клинического состояния и осложнений в зависимости от индивидуальных особенностей животного (рис. 6) .

Клинико-патoлогическое исследование собак, пораженных Theileria annae на Северо-Западе Испании, показало, что у 36% собак (n = 58) отмечалась азотемия; у этих животных смертность была в 10 раз выше, чем у собак без азотемии. . К сожалению, в этих исследованиях не приведены данные, показывающие корреляцию тяжести заболевания с выраженностью азотемии, но высокий белок в моче, повышенный креатинин, гипоальбуминемия и гиперхолестеринемия у больных собак заставила авторов предположить, что наиболее вероятной причиной поражения почек у собак при инфекции Theileria annae является гломерулонефрит . Вместе с тем исследования уровня азотемии у собак, зараженных B . rossi , показали, что уровень креатинина и мочевины не являлся прогностическим показателем возникновения острой почечной недостаточности с плохим прогнозом . В недавних исследованиях эндокринных маркеров болезни установлено, что отмечается корреляция между высокой смертностью собак, больных бабезиозом, вызванным B . rossi , и высоким уровнем кортизола и АКТГ, при одновременно низком уровне T4 .

До сегодняшнего дня нет ясности в клинических последствиях носительства и хронического течения бабезиоза. Имеются данные как о тяжелом прогнозе для животных с таким течением бабезиоза, так и о полном выздоровлении. Имеются сообщения о том, что у большинства собак после незначительных клинических проявлений заболевания развивается преиммунное состояние, которое может закончиться иммуннообусловленными осложнениями или развитием клинического заболевания в более позднее время. Вместе с тем хроническая инвазия может вообще не иметь никаких последствий для собак, а в неблагополучных районах — даже приводить к устойчивости животных к пироплазмозу .

Имидокарба дипропионат и диминазин ацетурат являются широко используемыми антипироплазменными препаратами. Но в течение многих лет использовались и другие препараты с различным терапевтическим эффектом, например, такие как квинурониума сульфат, трипан синий, пентамидин, фенамидин, парваквон. В разных странах регистрационные комитеты ограничили применение многих из этих препаратов, так как некоторые (особенно диамидин – производное диминазина) ассоциированы с высокой токсичностью и многими побочными эффектами. В лучшем случае эти препараты приводили к улучшению клинических признаков и редко — к элиминации возбудителя из организма собаки .

Сообщается об экспериментальном заражении и последующей терапии 4 собак. Исследователи добились излечения собак, зараженных B. g ibsoni, по следующему протоколу: диминазин в комбинации с клиндамицином и метронидазолом (15 мг/кг каждые 12 часов) и доксициклином (5 мг/кг каждые 12 часов) . Успешным оказалась терапия этих собак также по следующему протоколу: азитромицин (10 мг/кг каждые 12 часов) и atovaquone (13.3 мг/кг каждые 8 часов) в течение 10 дней.

Эффективность лечения определялась по нормализации клинических признаков и отсутствию ДНК B . gibsoni в периферической крови, определяемой методом ПЦР. Десятидневный курс лечения заболевания, вызванного B . gibsoni , сопровождался клинической эффективностью и отсутствием побочных эффектов. Вместе с тем цена на atovaquoneограничивает применение этого препарата, особенно там, где он больше всего нужен, — в азиатских странах. Более дешевые формы atovaquone с proguanil вызывают тяжелые побочные эффекты со стороны ЖКТ у собак (доступность данных препаратов в РФ ограничена).

К сожалению, эта комбинация препаратов также не приводит к выздоровлению у некоторых собак, при этом быстро возникает устойчивость к atovaquone, вызванная мутацией гена b-цитохрома .

Профилактировать бабезиоз (пироплазмоз), как и любое другое векторное заболевание, проще всего, не допуская нападения клещей на собак, но достичь этого практически невозможно, особенно в эндемичных районах, несмотря на широкое применение репеллентных спреев и ошейников .

Несколько препаратов были исследованы с целью их профилактического применения против бабезий, и ни один не дал надежных результатов. В Европе наиболее часто применяется однократная доза имидокарба (имидокарба дипропионат) в дозе 6 мг/кг, которая защищает собак от B . canis до 8 недель, его действие усиливается при одновременном применении доксициклина в дозе 5 мг/кг в день, особенно против высокопатогенных B . canis . .

Все данные по распространению различных видов бабезий получены из зарубежной литературы и касаются распространения бабезиоза за пределами Российской Федерации. Данные по распространению различных видов бабезий в России в доступной отечественной литературе мы не нашли.

Все данные по распространению различных видов бабезий получены из зарубежной литературы и касаются распространения бабезиоза за пределами Российской Федерации. Данные по распространению различных видов бабезий в России в доступной отечественной литературе мы не нашли, что и определило цель нашего исследования.

Материал и методы исследования. Исследования были проведены на 100 собаках, поступивших в клиники Ростовской области в период с начала октября по конец ноября (2010 года).

Все собаки были клинически здоровы, и у них не ставился диагноз бабезиоз (пироплазмоз) за весь предшествующий весенне-летний период. У животных отбиралась и стабилизировалась EDTA кровь. Исследования на бабезиоз (пироплазмоз) проводили методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией.

Анализ нуклеотидных полноразмерных геномов и участков различных генов бабезий, взятых из базы данных GenBank (NCBI) последовательностей, проводили с применением пакета прикладных программ «BioEdit 6.0». Исходя из нуклеотидного состава геномов бабезий разных видов, нами были выбраны участки 18S рРНК-гена, наиболее консервативные среди известных изолятов. На консервативные участки были рассчитаны родоспецифические праймеры BabspF (5’-GTTGCTTCTTAGAGGGACTTTGG-3’) и BabspR (5’-GCTCTAAGCCCTGAGGAAGTTTAAG-3’), фланкирующие участок в 282 пары нуклеотидов (п.н.).

Для идентификации вида бабезий исследовалась кровь от собак на присутствие видоспецифичных участков гена 18S рРНК. Исходя из диагностической ценности эксперимента для обнаружения кДНК конкретных видов бабезий, был выбран «стандартный» вариант ПЦР. С этой целью были сконструированы праймеры BrosF (5’-CTCACCAGGTCCAGACAAACG-3’) и BrosR (5’-GTAGGATTGACAGATTGATAGCTC-3’) к B . rossi , BcanF (5’-GATTCTTTGGGTGGTGGTGCATG-3’) и BcanR (5’-CGTTCTTAGTTGGTGGAGTGAT-3’) к B . canis и BvogF (5’-TGTCTGGTTAATTCCGTTAAC-3’) и BvogR (5’-GAACGAGACCTTAACCTGCTAACT-3’) к B . vogeli . Рассчитанные видоспецифичные праймеры для выявления кДНК имели высокую температуру отжига 62-64°С, это позволило объединить два этапа реакции (отжиг и элонгацию) в один. В результате удалось значительно снизить время постановки реакции, что не повлияло на её специфичность и чувствительность. Постановку ПЦР проводили в реакционной смеси стандартного состава с использованием 10 пкМ каждого праймера, 5 мкл раствора кДНК с добавлением 3 мM MgCl 2 .

Результаты исследования.
Нами были собраны клещи с территории Ростовской области с идентификацией их вида, результаты исследования занесены в таблицу 2.

Из таблицы видно, что наиболее ожидаемым видом бабезий, распространенным на территории Ростовской области, будет Babesia canis .

Таблица 2

Видовой состав иксодофауны Ростовской области

Из 100 собак, у которых была отобрана кровь на носительство бабезиоза, у 12 был получен положительный результаты в реакции ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией (рис. 12). Таким образом, носительство бабезиоза в Ростовской области составило 12%. Наибольшее распространение бабезиоз (пироплазмоз) получил среди таких пород как немецкая овчарка, метисы и таксы, но, учитывая незначительное количество собак, возможно, эта тенденция отображает только высокую распространенность данных пород в Ростовской области. Чтобы точнее ответить на этот вопрос, потребуются дополнительные исследования.

Таблица 3

Распространение носительства бабезиоза по породам собак

Нами были проведены дальнейшие исследования материала, положительного на наличие родовых генов к бабезиям. Все 12 положительных материалов были дополнительно исследованы в реакции ПЦР для определения вида возбудителя. Из 12 исследованных положительных материалов клинически здоровых животных положительный тест на B. canis оказался у 9 животных, номера исследования – 1, 7, 15, 28,29, 33, 35, 44, 56. Что составило 9 % от числа всех исследованных животных и 75% — от числа всех носителей. В 4 случаях тест оказался положительным на B . vogeli , номера исследования – 1, 15, 33, 35, что составило 4 % от числа всех исследованных животных и 33,3 % — от числа всех носителей. На B . rossi все пробы оказались отрицательными. При этом, как видно из рис. 7 и цифровых значений исследования, все животные, зараженные B . vogeli , были заражены и B . canis . Таким образом, в Ростовской области широко распространена микст-инвазия B . vogeli и B . canis .

Вместе с тем пробы 10, 39, 95 оказались отрицательными на B . vogeli , B . canis и B . rossi , что указывает, что в Ростовской области распространены не только эти бабезии (пироплазмы), но и другие виды. Мы планируем продолжить исследование и в ближайшее время представить материал о распространении всех видов бабезий на территории Ростовской области.

Выводы. Таки образом, на сегодняшний день бабезиоз (пироплазмоз) собак остается важной клинической проблемой, несмотря на серьезные достижения последних лет в понимании патогенеза этого заболевания. Остаются нерешенными проблемы передачи инфекции и ее патофизиологический механизм, много нерешенных вопросов в диагностике заболевания и терапии этой инвазии, открытыми остаются вопросы профилактики данного заболевания.

В настоящее время выделены неклассифицированные возбудители заболевания, не до конца выявлен ареал распространения, который, по всей видимости, будет продолжать расширяться из-за международного движения собак и расширения ареала клещей.

Носительство бабезиоза у собак в Ростовской области в конце периода передачи инвазии составляет 12 %, при этом инцидентность носительства B . canis составляет 9 % от числа всех исследованных животных, или 75% — от числа носителей, микст-инвазия B . canis и B . vogeli составила 4 % от числа всех исследованных животных, или 33,3 % — от числа всех носителей, в 25 % случаев идентифицировать вид бабезии (пироплазмы) не удалось.

Необходимо напомнить, что, по данным зарубежных авторов, носительство может приводить к аутоиммунным анемиям, поражениям почек и развитию фатальной почечной недостаточности. Поставить диагноз методом световой микроскопии таким животным невозможно, и при обычном исследовании в ветеринарной клинике такие диагнозы проходят как криптогенные, а гибель животных связывают с другими причинами.

Литература

1. Peter J Irwin, Canine babesiosis: from molecular taxonomy to control /4th International Canine Vector-Borne Disease Symposium Seville, Spain. 26–28 March 2009.
2. Kjemtrup AM,Wainwright K, Miller M, Penzhorn BL, Carreno RA: Babesia conradae, sp. nov., a small canine Babesia identified in California. Vet Parasitol 2006, 138:103-111.
3. Zahler M, Rinder H, Schein E, Gothe R: Detection of a new pathogenic Babesia microti-like species in dogs. Vet Parasitol 2000, 89:241-248.
4. Camacho AT, Pallas E, Gestal JJ, Guitiàn FJ, Olmeda AS, Goethert HK, Telford SR: Infection of dogs in north-west Spain with a Babesia microti-like agent. Vet Rec 2001, 149:552-555.
5. Criado-Fornelio A, Martinez-Marcos A, Buling-Saraña A, Barba-Carretero JC: Molecular studies on Babesia, Theileria and Hepatozoon in southern Europe Part I: Epizootiological aspects. Vet Parasitol 2003, 113:189-201
6. Matjila PT, Leisewitz AL, Ooshuizen MC, Jongejan F, Penzhorn B: Detection of a Theileria species in dogs in South Africa. Vet Parasitol 2008, 157:34-40.
7. Yamasaki M, Inokuma H, Sugimoto C, Shaw S, Aktas M, Yabsley MJ, Yamato O, Maede Y: Comparison and phylogenetic analysis of the heat shock protein 70 gene of Babesia parasites from dogs. Vet Parasitol 2007, 145:217-227
8. Birkenheuer AJ,Correa MT, Levy MG, Breitschwerdt EB:Geographic distribution of babesiosis among dogs in the United States and association with dog bites: 150 cases (2000-2003). J Am Vet Med Assoc 2005, 227:942-947.
9. Jefferies R, Ryan UM, Jardine J, Broughton DK, Robertson ID, Irwin PJ: Blood, bull terriers and babesiosis: further evidence for direct transmission of Babesia gibsoni in dogs. Aust Vet J 2007, 85:459-463.
10. 57. Lobetti RG, Jacobsen LS: Renal involvement in dogs with babesiosis. J Sth Afr Vet Assoc 2001, 72: 23-28.
11. de Scally MP, Lobetti RG, Reyers F, Humphris D: Are urea and creatinine values reliable indicators of azotaemia in canine babesiosis? J Sth Afr Vet Assoc 2004, 75:121-124.
12. Schoeman JP, Rees P, Herrtage ME: Endocrine predictors of mortality in canine babesiosis caused by Babesia canis rossi. Vet Parasitol 2007, 148:75-82.
13. Wulansari R,Wijaya A,Ano H, Horii Y, Nasu T,Yamane S, Makimura S: Clindamycin in the treatment of Babesia gibsoni infections in dogs. J Am Anim Hosp Assoc 2003, 39:558-562.
14. Suzuki K,Wakabyashi H,Takahashi M, Fukushima K,Yabuki A, Endo Y: A possible treatment strategy and clinical factors to estimate the treatment response in Babesia gibsoni infection. J Vet Med Sci 2007, 69:563-568.
15. Vercammen F, de Deken R, Maes L: Prophylactic treatment of experimental canine babesiosis (Babesia canis) with doxycycline. Vet Parasitol 1996, 66:251-255.

доктор биологических наук, профессор Карташов С.Н. ,
кандидат ветеринарных наук Ключников А.Г.

ОБЯЗАТЕЛЬНО К ПРОЧТЕНИЮ ВСЕМ ВЛАДЕЛЬЦАМ СОБАК!

перепост приветствуется
Даже если Ваша собака никогда не болела и не заболеет, знать про это заболевание каждому владельцу собак нужно обязательно, т.к. каждую весну и осень пироплазмоз носит массовый характер. Итак, что это такое и с чем это едят:

Не все клещи являются переносчиками. С собаки можно снять 20 клещей, и ничего не будет. А можно снять всего одного, и если он был переносчиком, собака заболеет. Неприсосавшийся (только еще ползающий по шерсти) клещ небольших размеров и по виду напоминает небольшого паука или даже крабика (если сильно присмотреться). Если во время прогулки в парке вы заметили на шести собаки подобную живность, сразу ее стряхивайте, проверяйте на предмет уже присосавшихся и больше в то место не ходите, целее будете.

Если вы сняли с собаки клеща, сразу ехать с питомцем на анализы смысла нет, в первый день бабезий в переферической крови (а берется анализ из уха) скорее всего не будет, и отрицательный анализ будет ложным успокоением. Также полностью бессмысленно везти на анализ самого клеща (а часто привозят, да). По клещу НИКАК не определить, является он переносчиком или нет . Если сняли клеща - наблюдайте за состоянием собаки, не ленитесь мерять температуру не реже 4-5 раз в день.
Первые симптомы:
1) Повышенная температура. Норма у собак до 39,0с (для тех, кто не знает, температуру меряют ректально, в заднем проходе)
2) Вялость, угнетение
3) Тяжелое дыхание без причины (тяжелое дыхание возникает из-за гипоксии, т.к. эритроциты разрушаются и нечему переносить кислород к органам и тканям, в т.ч. к мозгу
4) Темная моча (как говорится «цвет мясных помоев», можно еще сравнить по цвету с коньяком и крепким чаем
5) Шаткость походки

По поводу вакцин... Запомните , вакцин от пироплазмоза НЕ СУЩЕСТВУЕТ! Да, была вакцина, «Пиродог» (фирмы Мериал) но она настолько малоэффективна, что сами представители прозводителя не стесняются об этом говорить и в Россию она официально не ввозится (если вообще еще выпускается).
Другие препараты не являются вакцинами (аккуратнее с интернетом, на разных сайтах периодически чересчур «умные» люди называют то один, то другой препарат вакциной от пироплазмоза и чаще всего препараты эти не безобидные !).
Используемые при лечении пироплазмоза препараты (Верибен, Беренил, Азидин и тд) КАТЕГОРИЧЕСКИ ЗАПРЕЩАЕТСЯ применять с профилактической целью!!!
Эти препараты вводятся ОДНОКРАТНО в начале лечения ПОДТВЕРЖДЕННОГО анализом крови пироплазмоза. Введение их без результатов анализа на пироплзмоз можно оправдать только отсутствием лабораторий в городе или нахождением в отдаленной сельской местности. Эти препараты крайне токсичны , и при лечении пироплазмоза лечат не только последствия «деятельности» пироплазм в организме животного, но и последствия введения этих препаратов. Но без них не обойтись - лишь они убивают пироплазмы в крови собаки. Помните, что препарат вводится строго по весу ! Помните - если в ветеринарной клинике, куда вы обратились с тем, что сняли с собаки клещей, предлагают при отсутствии симптомов и анализа крови сделать какой-либо из этих препаратов «на всякий случай», или, что еще хуже, позиционируют его как вакцину - это повод серьезно задуматься...
Если с заболевшей пироплазмозом собакой вы первично обратились в одну клинику, а дальше по каким-то причинам лечиться будете в другой, возьмите из клиники все выписки (что вводили, сколько, когда и пр., а также результаты всех проведенных анализов и исследований). Если вам не отдают результаты анализов, заключение по УЗИ и пр. (бывает такая политика в немногих клиниках) - требуйте, вы имеете на это право, поскольку вы оплатили деньги и вправе получить результаты исследований. Отдельным пунктом узнайте и отметьте, вводился ли (и когда и сколько) специфический препарат (Верибен, Беренил, Азидин и пр.). Это очень важно!

И на последок - симптомы каких заболеваний могут быть похожи на симптомы пироплазмоза :
1) Цистит и пиелонефрит (темная (или с явной кровью) моча, повышение температуры, слабость и шаткость походки (при почечной колике)
2) Отравление гемолитическим ядом (от крыс) (темная моча из-за крови, анемия, слабость)
3) Гепатит (из-за билирубина моча может быть темной)
4) Лептоспироз.

Зарипова Эльвина Марседевна,студентка 5 курса факультета биотехнологий и ветеринарной медицины ФГБОУ ВО Башкирский ГАУ, г. Уфа[email protected]

Ильясова Зулейха Закуановна,кандидат биологических наук, доцент кафедры инфекционных болезней, зоогигиены и ветсанэкспертизы ФГБОУ ВО Башкирский ГАУ, г. Уфа[email protected]

Гематологические показатели крови собак при пироплазмозе

Рис. 1.Собакис клиническими признаками бабезиоза

Рис.2.Взятие крови у собакиРис. 3. Анализатор ABACUS Plus

Для микроскопического исследования использовали мазок крови, окрашенный по РомановскомуГимза(рисунок 4):на чистое обезжиренное стекло наносят каплю крови и при помощи покровного стекла делают тонкий мазок.Приготовление мазка занимает около 30 мин. Просматривают его под большим увеличением (об. х 90) с использованием масляной иммерсии (рисунок 5). После окраски по РомановскомуГимза в эритроцитах обнаруживаются пироплазмы грушевидной формы, чаще расположенные парами .

Рис.4.Мазки кровиРис.5.Микроскопия мазков

Рис. 6.Неозидин МРис.7.Тилозин 50

Тилозин 50 (рисунок 7) представляет собой прозрачную, слегка вязкую жидкость светложелтого цвета с характерным запахом. Тилозин действует на грамположительные и некоторые грамотрицательные бактерии, в том числе: стрептококки, стафилококки, лептоспиры, коринебактерии, клостридии, эризепилотриксы, пастереллы, хламидии, спирохеты и микоплазмы. Терапевтический уровень антибиотика сохраняется в организме в течение 2024 часов. По степени воздействия на организм относится к малоопасным веществам.Натрий хлорид (рисунок 8) изотонический 0,9% раствор для инъекций, содержит в 1 мл в качестве действующего вещества натрия хлорида 9 мг,а в качестве вспомогательного вещества -воду для инъекций до 1 мл. Представляет собой прозрачную бесцветную жидкость. Относится к веществам малоопасным (4 класс опасности), не оказывает раздражающего действия на ткани.

Рис.8.Натрий хлоридРис.9.Цианокобалин

Рис.10.Имохем 120Рис.11.Синулокс

Гамавит (рисунок 12) относится к комбинированным иммуномодулирующим лекарственным препаратам. Применение препарата стимулирует естественную резистентность, повышает бактерицидную активность сыворотки крови, устойчивость животных к стрессу и чрезмерным нагрузкам, оказывает иммуномодулирующее действие, повышает сохранность и привесы молодняка. По степени воздействия на организм Гамавит относится к малоопасным веществам (4 класс опасности по ГОСТ 12.1.007).

Рис.12.ГамавитРис. 13. Раствор Рингера Локка

Раствор Рингера –Локка (рисунок 13) –это раствор для инъекций, относится к препаратам, влияющим на водноэлектролитный баланс в организме. Препарат используется как регидратирующее средство, для стабилизации водного и электролитного состава крови, оказывает дезинтоксикационное действие, по степени воздействия на организм относится к веществам малоопасным (4 класс опасности по ГОСТ 12.1.00776).

Предварительный диагноз ставили на основании клинических признаков, также учитывали сообщение владельцев собак о покусе клещом или снятие клеща.Для подтверждения диагноза пироплазмоза собак, проводили следующие исследования:1. Оценка и анализ мочи.При оценке и анализе мочи: моча была темного цвета.2. Лабораторное исследование крови (рисунок 15):уровень гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов и скорость оседания эритроцитов (СОЭ).

Рис.15.Клинический анализкрови

3. Проведение микроскопического исследование крови по Романовскому –Гимза. При оценке микроскопического исследования в мазке обнаружили бабезии грушевидной формы (рисунок 16).

Рис.16.Пироплазмы грушевидной формы

Окончательный диагноз устанавливали на основании клинических данных, учитывали эпизоотическую ситуацию (отмечались ли ранее в данной местности случаи пироплазмоза), клинические признаки, патоморфологические изменения и результаты лабораторного исследования.Таким образом, диагноз на пироплазмоз собак считают установленным по характерным клиническим признакам и результатам лабораторных исследований.Изменения показателей гемоглобина, гематокрита, содержание количества тромбоцитов, эритроцитов, нейтрофилов в крови собак исследуемых групп представлены в таблице 2.Гемоглобин (Нв) –сложный белок (хромопротеид) -окрашивает эритроциты в красный. Гемоглобин играет важную роль в переносе углекислого газа от тканей в органы дыхания. В норме количество гемоглобина у собак колеблется в пределахот 115 до 180 г/л крови. Увеличение или уменьшение количества гемоглобина почти всегда говорит о патологии. Повышение гемоглобина в крови (гиперхромемия) может быть следствием гипоксии (кислородного голодания, значительных физических нагрузок и стресса, дегидратации (недостатка воды в организме животного), эритроцитозов или внутрисосудистого гемолиза (растворения эритроцитов). Снижение количества гемоглобина (гипохромемия) может указывать на анемию, злокачественные опухоли и их метастазы, кровопотерю, скрытые кровотечения, заболевания костного мозга, почек .Таблица 2

Динамика гематологических показателей крови (гемоглобина, гематокрита, содержание количества тромбоцитов, эритроцитов, нейтрофилов)

ПоказателиГруппыНормаСтат. показательДни исследованийФон4день10деньГемоглобин, г/л1группа115180M74,178,390,9±m±0,2± 0,4± 0,42 группаM75,186,5117,7±m± 0,2± 0,2± 0,2Гематокрит, %1группа37 54M28,629,232,1±m± 0,2± 0,2± 0,22 группаM28,931,237,7±m± 0,3± 0,3± 0,2Количествоэритроцитов, 1012/л1 группа6 -17M3,23,43,9±m±0,02±0,01±0,022 группаM3,33,86,0±m±0,03±0,03±0,02Нейтрофилы юные, %1 группа-M4,03,72,4±m± 0,2± 0,3± 0,22 группаM4,33,11,2±m± 0,2± 0,2± 0,2Тромбоциты, кл/л

1 группа200 500M7897115±m±15±19±232 группаM69112202±m±13±22±40

Таблица 3Динамика гематологических показателей крови

ПоказателиГруппыНормаСтат. показательДни исследованийФон4день10днейЦветной показатель1 группа0,65 –0,9M0,70,780,84±m±0,02±0,02±0,022 группаM0,740,880,93±m±0,02±0,01±0,01Лимфоциты, %1 группа12 -30M31,030,129,3±m± 0,2± 0,1± 0,22 группаM32,228,621,3±m± 0,3± 0,2± 0,2Моноциты, %1 группа3 -10M13,012,811,3±m± 0,2± 0,1± 0,22 группаM14,212,17,6±m± 0,2± 0,3± 0,2Эозинофилы, %1 группа2 -10M1110,810,4±m± 0,2± 0,2± 0,22 группаM11,310,15,9±m± 0,2± 0,1± 0,3Базофилы, %1 группа0 -1M---±m---2 группаM---±m---Лейкоциты, 109/л1 группа6 -17M17,918,217,2±m±0,04±0,05± 0,22 группаM18,017,717,1±m±0,04±0,03±0,02

Обследуя животное, не всегда удаётся быстро и главное точно, поставить диагноз. Упуская время остаётся всё меньше надежды на выздоровление без осложнений и только анализ крови при пироплазмозе у собак может быстро поставить диагноз.

Пироплазмида (Piroplasmidеa) - это простейшее. Проводя классификацию, пироплазму собак отнесли к роду Babesia, и болезнь назвали бабезиозом, хотя пироплазмоз также встречается как термин.

Важно! Возбудитель не живёт в природе и имеет два хозяина - собаку и клеща.

Клещ, который укусил собаку не всегда способен заразить. Животное не заболеет если:

• имеет высокий иммунитет (резистентность организма);
• контактирует с клещами не часто (единичные случаи);
• возбудитель имеет низкую патогенность.

Если клещ передал животному пироплазму, то инкубационный период у собак проходит на протяжении 4-5 дней. Далее следует симптоматика:

• угнетение;
• повышение температуры (не постоянное, до 4-х дней, далее спад);
• бледность видимых слизистых оболочек с дальнейшим пожелтением;
• отсутствие или понижение аппетита;
• моча становится кровавой.

Иногда симптомы бывают стёрты, и заболевание приобретает хронический характер. В этом случае собака:

• медленно теряет вес;
• резвость сменяется угнетением;
• слизистые попеременно бледные и жёлтые;
• аппетит временами отсутствует.

Общий анализ крови

Для диагностирования заболевания следует провести исследование с покраской мазка крови. Для этой цели кровь отбирается с внутренней поверхности ушной раковины и наносится на предметное стекло. Далее следует покраска по Романовского-Гимза. Метод

• универсальный;
• не требующий высокоточного инструментария и приборов;
• может проводиться амбулаторно (в кабинете доктора или ветеринарной лаборатории);
• быстрый.

Кроме отчётливо выявленных пироплазм существует ещё несколько пунктов указывающих на присутствие патологии:

• наличие не зрелых, мелких эритроцитов (анизоцитоз) более 50%;
• эритроциты будут иметь не стандартную, круглую форму, а разнообразную, деформированную (пойкилоцитоз);
• окраска эритроцита будет проходить не равномерно, с включениям, высветленными зонами либо более интенсивно окрашенными (полихроматофиллия);

Если выявить пироплазму не удаётся, то проводя исследования показателей крови можно определить общее состояние животного. На патологию будут указывать:

• уменьшение количества эритроцитов в два раза;
• понижение уровня гемоглобина на 30%;
• увеличение скорости оседания эритроцитов;
• понижение количества лейкоцитов.

Характерными показателями патологии при пироплазмозе будут:

• значительное уменьшение уровня тромбоцитов в крови (тромбоцитопиния);
• увеличение количества моноцитов на фоне общего уменьшения лейкоцитов (моноцитоз).

Все показатели крови остаются актуальными на фоне нормы белка и глюкозы в крови, что дифференцирует пироплазмоз от других заболеваний.

Необходимо определить уровень:

• билирубина. Если эритроциты разрушаются, гемоглобин преобразовывается, распадается в клетках печени, о чём и свидетельствует показатель;
• мочевину. Повышение концентрации свидетельствует о нарушениях в функциональности почек.

ПЦР при пироплазмозе3

Современные лаборатории оснащены всем необходимым для проведения полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Такое серологическое исследование позволяет поставить точный диагноз даже в инкубационном периоде. Однако совершенно неприемлемо для исследований крови животного, которое поддавалось лечению. Когда возбудителя в организме уже нет, но он оставил следы своего ДНК, реакция выдаёт - положительно. Это происходит из-за высокой чувствительности метода к следам возбудителя.

По результатам реакции можно установить диагноз, но нельзя определить продолжать лечение или терапия окончена.

О том, какие именно анализы следует провести собаке, при подозрении на пироплазмоз, может судить только квалифицированный специалист после проведённого всестороннего осмотра.